PCR synaglarynda köplenç ulanylýan birnäçe ferment

Polimeraza zynjyryň reaksiýasy, gysgaldylyşy ýalyPCRIňlis dilinde, belli bir DNK böleklerini güýçlendirmek üçin ulanylýan molekulýar biologiýa usulydyr.Bedeniň daşyndaky ýörite DNK köpeltmek hökmünde kabul edilip bilner, bu bolsa gaty az mukdarda DNK köpeldip biler.Tutuşlygyna alnandaPCRreaksiýa prosesi, maddalaryň bir synpy möhüm rol oýnaýar - fermentler.

1. Tak DNK

Ilkinji günlerinde geçirilen synaglardaPCR, alymlar Escherichia coli DNK polimeraza I ulandylar, ýöne bu fermentde bir mesele bar: her gezek bir sikl ýerine ýetirilende täze fermenti doldurmaly, bu amal ädimlerini birneme çylşyrymlaşdyrýar we doly awtomatiki güýçlendirmek kyn.Bu mesele alymlar 1988-nji ýylda Taq DNK polimerazyny Termus suwundan tötänleýin izolýasiýa edensoň çözüldi. Şondan bäri DNK-nyň awtomatiki güýçlendirilmegi hakykata öwrüldi.Bu fermentiň tapylmagy hem edýärPCRtehnologiýa amatly, amaly we uniwersal tehnologiýa.Häzirki wagtda Taq DNK polimeraza DNK toplumlarynda iň köp ýaýran polimeraza degişlidir.

2. PfuDNA

Aboveokarda belläp geçişimiz ýaly, Taq DNase-de uly näsazlyk bar, şonuň üçin alymlar taq DNK polimerazyny belli bir derejede üýtgetmediler, gabat gelmeýänligi sebäpli synag synaglarynyň nädogry bolmagyna sebäp bolmazlygy üçin belli bir derejede üýtgetdiler.Emma Taq DNK polimerazynyň üýtgemegi, DNK polimerazynyň otag temperaturasynda işjeňligini saklap biler.PfuDNA polimeraza, Taq DNK polimerazynyň ýokardaky kemçiliklerini öwezini dolup biler, şeýlelik bilen PCR reaksiýasy kadaly amala aşyrylyp bilner we maksatly gen güýçlendirmegiň üstünlik derejesi netijeli gowulaşyp biler.

3. Tersine transkriptaz

Tersine transkriptaz 1970-nji ýylda ýüze çykaryldy. Bu ferment RNK-ny şablon, dNTP substrat hökmünde ulanýar, esasy jübütlemek ýörelgesine eýerýär we 5′-3 ′ ugurda RNK şablonyna goşmaça DNK sintez edýär.Ters transkriptaz, esasan DNK ýa-da RNK şablonlaryndan DNK polimeraza işjeňligine baglydyr we şonuň üçin 3′-5 ′ ekzonukleýasiýa işjeňligi ýok.Şeýle-de bolsa, ters transkriptazyň sintez uzynlygyny belli bir derejede çäklendirýän RNase H işjeňligi bar.Wildabany ters transkriptazanyň pes wepalylygy we termostallygy sebäpli alymlar hem ony üýtgetdiler.

ÜçinPCRsynaglar, esasy sarp edilýän zatlar ： aýratyn PCR turbasy, 4/8 zolakly PCR turbasy, PCR plitalary.

Labio'sPCR sarp edilýän zatlaraşakdakylar barartykmaçlyklary:

PCR plitalary: Giň termiki welosiped utgaşyklygy;Contrastokary kontrastly, aňsat gowy kesgitlemek;gowy floresan şöhlelenmesi; gowyýylylyk geçiriji;Kepillendirilen DNase, RNase, DNK, PCR ingibitorlary we pirogensiz synag edildi.

Aýry-aýry PCR turbalary: Buglanmaga çydamly; gowyýylylyk geçiriji;ajaýyp optiki aýdyňlyk; Sertifikatly DNase, RNase, DNK, PCR ingibitorlary we pirogensiz synag edildi.

4/8 zolakly PCR turbalary: Ultra inçe diwarlar; ýokary aýdyňlyk; gowy floresan şöhlelenmesi;derman senagatynda, azyk senagatynda we molekulýar biologiýada ulanyp biler; ýokary hilli, bakja PP materialy; Sertifikatly DNase, RNase, DNK, PCR ingibitorlary we pirogensiz synag edildi.